上海紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)應(yīng)用詳解

　　紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)的應(yīng)用：

　　分子的紫外可見(jiàn)吸收光譜是由于分子中的某些基團(tuán)吸收了紫外可見(jiàn)輻射光后，發(fā)生了電子能級(jí)躍遷而產(chǎn)生的吸收光譜。由于各種物質(zhì)具有各自不同的分子、原子和不同的分子空間結(jié)構(gòu)，其吸收光能量的情況也就不會(huì)相同，因此，每種物質(zhì)就有其*的、固定的吸收光譜曲線，可根據(jù)吸收光譜上的某些特征波長(zhǎng)處的吸光度的高低判別或測(cè)定該物質(zhì)的含量，這就是分光光度定性和定量分析的基礎(chǔ)。

　　分光光度分析就是根據(jù)物質(zhì)的吸收光譜研究物質(zhì)的成分、結(jié)構(gòu)和物質(zhì)間相互作用的有效手段。它是帶狀光譜，反映了分子中某些基團(tuán)的信息。可以用標(biāo)準(zhǔn)光圖譜再結(jié)合其它手段進(jìn)行定性分析。

　　上海紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)的用途主要?dú)w納為以下幾點(diǎn)：

　　1、鑒定物質(zhì)。用來(lái)測(cè)量待測(cè)物質(zhì)對(duì)可見(jiàn)光的吸光度并進(jìn)行定量分析的儀器，稱為可見(jiàn)分光光度計(jì)；紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)用來(lái)測(cè)量待測(cè)物質(zhì)對(duì)可見(jiàn)光或紫外光的吸光度并進(jìn)行定量分析的儀器。可以測(cè)定核酸和蛋白的濃度，也可以測(cè)定細(xì)菌細(xì)胞密度；

　　2、待測(cè)物質(zhì)是標(biāo)準(zhǔn)物及標(biāo)準(zhǔn)圖譜對(duì)照進(jìn)行分析；

　　3、比較zui大吸收波長(zhǎng)吸收系數(shù)的一致性；

　　4、物質(zhì)的純度檢驗(yàn)；

　　5、是推測(cè)化合物的分子結(jié)構(gòu)及構(gòu)成；

　　6、是判定絡(luò)合物的組成及穩(wěn)定常數(shù)的測(cè)定。

　　根據(jù)Lambert-Beer定律說(shuō)明光的吸收與吸收層厚度成正比，比耳定律說(shuō)明光的吸收與溶液濃度成正比；如果同時(shí)考慮吸收層厚度和溶液濃度對(duì)光吸收率的影響，即得朗伯-比耳定律。即A=εbc，(A為吸光度，ε為摩爾吸光系數(shù)，b為液池厚度，c為溶液濃度)就可以對(duì)溶液進(jìn)行定量分析。

　　將分析樣品和標(biāo)準(zhǔn)樣品以相同濃度配制在同一溶劑中，在同一條件下分別測(cè)定紫外可見(jiàn)吸收光譜。若兩者是同一物質(zhì)，則兩者的光譜圖應(yīng)*一致。如果沒(méi)有標(biāo)樣，也可以和現(xiàn)成的標(biāo)準(zhǔn)譜圖對(duì)照進(jìn)行比較。這種方法要求上海紫外可見(jiàn)分光光度計(jì)的準(zhǔn)確，精密度高，且測(cè)定條件要相同。

　　實(shí)驗(yàn)證明，不同的極性溶劑產(chǎn)生氫鍵的強(qiáng)度也不同，這可以利用紫外光譜來(lái)判斷化合物在不同溶劑中氫鍵強(qiáng)度，以確定選擇哪一種溶劑。