721分光光度計是一種經(jīng)典且廣泛應(yīng)用的可見光分光光度計，在化學(xué)分析領(lǐng)域發(fā)揮著重要作用。它通過對物質(zhì)在特定波長下吸光度的測量，實現(xiàn)對物質(zhì)含量的定量分析以及物質(zhì)結(jié)構(gòu)的定性研究。 一、儀器預(yù)熱與檢查
在使用之前，先要進(jìn)行儀器預(yù)熱。接通電源后，打開儀器開關(guān)，讓儀器預(yù)熱，使儀器各部件達(dá)到穩(wěn)定的工作狀態(tài)。同時，檢查儀器的外觀是否完好，比色皿架是否清潔，波長調(diào)節(jié)旋鈕是否靈活，以及吸光度顯示是否正常等。
1、波長選擇
根據(jù)待測物質(zhì)的吸收特性，選擇合適的測量波長。通常可以通過查閱相關(guān)資料或進(jìn)行預(yù)實驗來確定較佳波長。在721分光光度計上，通過旋轉(zhuǎn)波長調(diào)節(jié)旋鈕來設(shè)置所需的波長值。
2、比色皿的準(zhǔn)備與校準(zhǔn)
比色皿是分光光度計中用于盛放樣品溶液的重要部件。在使用前，需要選擇與儀器配套的比色皿，并確保其清潔、透明且無劃痕。為了消除比色皿之間的差異對測量結(jié)果的影響，需要進(jìn)行比色皿的校準(zhǔn)。通常采用空白溶液分別裝入各個比色皿中，在選定的波長下測量其吸光度，然后調(diào)整儀器的零點，使吸光度為零。接著，依次測量各個比色皿的吸光度，記錄下偏差值，在后續(xù)測量中根據(jù)偏差值對測量結(jié)果進(jìn)行修正。
3、標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制
為了實現(xiàn)對未知樣品的定量分析，需要先繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。
配制一系列不同濃度的標(biāo)準(zhǔn)溶液，濃度范圍應(yīng)涵蓋待測樣品的可能濃度范圍。
將標(biāo)準(zhǔn)溶液依次倒入比色皿中，放入分光光度計的樣品池中進(jìn)行測量，記錄下每個標(biāo)準(zhǔn)溶液在選定波長下的吸光度值。以標(biāo)準(zhǔn)溶液的濃度為橫坐標(biāo)，吸光度值為縱坐標(biāo)，繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線。通過線性回歸分析，得到標(biāo)準(zhǔn)曲線的方程和相關(guān)系數(shù)。
二、未知樣品的測定
在完成標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制后，即可對未知樣品進(jìn)行測定。將未知樣品處理成溶液形式，倒入比色皿中，按照與標(biāo)準(zhǔn)溶液相同的測量條件進(jìn)行測量，得到未知樣品的吸光度值。將吸光度值代入標(biāo)準(zhǔn)曲線方程中，即可計算出未知樣品中待測物質(zhì)的含量。
三、注意事項
在使用光度計進(jìn)行化學(xué)分析時，還需要注意一些事項。
1、要保證實驗環(huán)境的穩(wěn)定性，避免外界因素對測量結(jié)果的影響。
2、要注意儀器的清潔和維護(hù)，定期清洗比色皿和儀器內(nèi)部，防止雜質(zhì)和污垢對測量結(jié)果產(chǎn)生干擾。
3、在測量過程中要嚴(yán)格控制實驗條件的一致性，以確保測量結(jié)果的準(zhǔn)確性和可靠性。
使用721分光光度計進(jìn)行化學(xué)分析需要嚴(yán)格按照操作規(guī)程進(jìn)行，從儀器預(yù)熱、波長選擇到標(biāo)準(zhǔn)曲線繪制和樣品測定，每一個環(huán)節(jié)都至關(guān)重要。
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